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・１ １８・ 色 血液时不发生蛋白质凝固，萃取可顺利进行，且萃取 率高。用不同种类的树脂萃取，未发现结果有明显 的差别。树脂用量以０．３ ａｍ 为宜，过少时萃取率 低，过多使用没有必要。用４ ｍＬ乙醚、二氯甲烷或 乙酸乙酯均可洗脱完全，但用３ ｍＬ洗脱剂均洗脱 不完全。鉴于使用乙醚作洗脱剂时样品浓缩容易， 故本文选用４ ｍＬ乙醚作洗脱剂。用本文选定的方 法处理血样，２，４一Ｄ、２，４一ＤＰ、ＭＣＰＡ和ＤＣＰＡ的提 取率分别为８７％，９０％，９１％和９１％，提取液中杂质 较少（空白血样经萃取、衍生化、气相色谱分析所得 的色谱图中杂质峰较少、较弱（见图１－ａ））。 ２．３衍生化反应条件的选择 取３种除草剂和内标物各５ ｇ加入空白血样 萃取液中，挥干，考察不同的醇和催化剂用量、反应 温度、反应时间等条件下衍生化对目标物测定的影 响，结果表明：本文所用条件可使除草剂及内标物衍 生化反应完全（酯化反应理论上不能完全，本文的 完全是指目标物原体的色谱峰消失、衍生物色谱峰 面积不再随反应条件的变化而增加），且试剂用量 较少、反应温度较低、反应时间较短。 文献中有用甲醇、乙醇、三氟乙醇等在硫酸催化 下进行衍生化反应的气相色谱法分析水、土壤或农 作物中苯氧羧酸类除草剂的报道，其衍生化条件中 醇的用量为１～２ ｍＬ，硫酸的用量为０．２～０．５ ｍＬ 。本文研究二氯丙醇衍生化的反应条件时， 首先采用前述试剂量，然后逐渐减少，发现用４０ Ｌ 二氯丙醇和１０ Ｌ硫酸即可使衍生化反应完全；用 甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇和三氟乙醇进行衍生化 时同样发现这一试剂用量也可以使衍生化反应完 全。减少试剂用量的优点是杂质干扰弱，操作方便。 另外，衍生化试剂的用量与所要测定的血样中除草 剂的含量有关，如果除草剂的含量过高，前述方法中 的试剂用量可能不足，此时可以减少血样用量。本 文的研究还发现，用上述非卤代醇进行衍生化只需 在室温下反应３０ ｍｉｎ，且测定血样中的２，４一Ｄ和２， ４－ＤＰ的灵敏度甚至比用二氯丙醇衍生化还好，但是 测定ＭＣＰＡ的灵敏度低，即便血样中添加５００ ｎｇ／ｍＬ的ＭＣＰＡ也不能检测到。用三氟乙醇衍生 化所建立的方法的灵敏度与二氯丙醇衍生化相似， 但是试剂需进口。 ２．４检测限 在空白血样中添加２，４－Ｄ和２，４－ＤＰ各５０ 谱 第２６卷 ｎｇ／ｍＬ和ＭＣＰＡ ｌＯ０ ｎｇ／ｍＬ进行分析，以３倍基线 噪声（ Ⅳ＝３）计算除草剂的检测限，结果见表１。 ２．５工作曲线和回收率 在空白血样中添加２，４一Ｄ和２，４－ＤＰ各５０～ １ ０００ ｎｇ／ｍＬ，ＭＣＰＡ １００～１ ０００ ｎｇ／ｍＬ，内标ＤＣ— ＰＡ ５００ ｎｇ／ｍＬ，制作工作曲线。取空白血样７份， 均添加２，４－Ｄ、２，４－ＤＰ和ＭＣＰＡ各２００ ｎｇ／ｍＬ，ＤＣ－ ＰＡ ５００ ｎｇ／ｍＬ，测定回收率，结果见表１。 表１ ３种苯氧羧酸除草剂在空白血样中 的Ｔ作曲线和回收率（，ｌ＝７） 分析物 工作曲线 回 率／ＲＳＤ／ ％２．４一Ｄ ２０ Ｙ＝０．００２３ＩＸ＋０．００４ｌ ０．９９５５ ｌ０３．３ １０ ２．４一ＤＰ ８ ｌ，＝０．００２８２Ｘ一０．００６０ ０．９９９６ ｌ０１．１ ９．３ ＭＣＰＡ ４０ ｌ，＝０．００１０３ —Ｏ．００８１ Ｏ．９９９７ ９８．８ １１．Ｏ 王，：分析物与内标峰面积比； ：除草剂浓度，ｎｇ／ｍＬ． ２．６样品分析 取体重１．２ ｋｇ的家兔一只，灌服２，４－Ｄ、２，４－ ＤＰ和ＭＣＰＡ各０．５ ｇ，兔于５ ｈ后死亡。取血样用 本文建立的方法进行分析，３种除草剂含量分别为 ２６３．１，２７６．８和３４３．１￣ｇ／ｍＬ。 文献［１］报道一例口服２，４－Ｄ自杀死亡案例， 血中检出２，４－Ｄ含量为３８９￣ｇ／ｍＬ；文献［２］报道一 例口服２，４－Ｄ除草剂自杀死亡案例，血中检出２，４－ Ｄ含量为５２０￣ｇ／ｍＬ；文献［３］报道的该类除草剂 致死血浓度也类似。这些数据与本文方法的检测限 比较，表明本文方法测定致死血样浓度有足够高的 灵敏度。 参考文献： ［１］Ｋｅｌｌｅｒ Ｔ，ＳｋｏｐｐＧ，ＷｕＭ，ｅｔ ａｌ （１）：１３ ［２］ＦｒａｓｅｒＡ Ｄ，Ｉｓｎｅｒ Ａ Ｆ，Ｐｅｒｒｙ Ｒ Ａ．Ｊ Ｆｏｒｅｎ Ｓｃｉ，１９８４，２９ （４）：１ ２３７ ［３］ Ｃｏｕｔｓｅｌｉｎｉｓ Ａ，Ｋｅｎｔａｒｃｈｏｗ Ｒ，Ｂｏｕｋｉｓ Ｄ．Ｊ Ｆｏｒｅｎ Ｓｃｉ，１９７７， ｌ０：２０３ ［４］Ｈｏｎｇ ＭＫ，ＫｉｍＭＣ，ＳｍｉｔｈＡＥ．ＪＡＯＡＣＩｎｔ，１９９６，７９（４）：９９８ ［５］ＬｅｅＡ Ｓ，ＨｏｎｇＭ Ｋ，ＳｍｉｔｈＡ Ｅ．ＪＡＯＡＣＩｎｔ，１９９５，７８（６）： ｌ ４５９ ［６］ Ｓｃｈｅｙｅｒ Ａ，Ｂｒｉａｎｄ Ｏ，Ｍｏｒｖｉｌｌｅｓ，ｅｔ ａ１．Ａｎａｌ Ｂｉｏａｎａｌ Ｃｈｅｍ， ２００７，３８７（１）：３５９ ［７］Ｓａｌｅｍ Ａ Ａ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｓｃｉ，２００７，４５（３）：１３１ ［８］Ｈｕｇｈｅｓ Ｄ Ｌ，Ｒｉｔｔｅｒ Ｄ Ｊ，Ｗｉｌｓｏｎ Ｒ Ｄ．Ｊ Ｅｎｒｉｒｏｎ Ｓｃｉ Ｈｅａｌｔｈ Ｂ，２００ｌ，３６（６）：７５５ ［９］ Ｗｕ Ｊ，Ｌｅｅ Ｈ Ｋ．Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ，２００６，７８（２０）：７ ２９２ ［１Ｏ］ Ｏｌｉｖｅｒｉｒａ Ｇ Ｈ，Ｐａｌｅｒｍｏ－Ｎｅｔｏ Ｊ．Ｊ Ａｎａｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ，１９９５，１９ （４）：２５１